Characterization of a thermally stable ?-galactosidase produced by thermophilic anoxybacillus sp. AH1

Basit Öğe Kaydı
dc.authorid0000-0002-5314-0475en_US
dc.authorid0000-0001-8253-9568en_US
dc.contributor.authorAcer, Ömer
dc.contributor.authorBekler, Fatma Matpan
dc.date.accessioned2024-02-16T07:17:37Z
dc.date.available2024-02-16T07:17:37Z
dc.date.issued2021en_US
dc.departmentDicle Üniversitesi, Fen Fakültesi, Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümüen_US
dc.description.abstractThermostable β-galactosidases from thermophilic bacteria have attracted increasing interest to have various advantages in industrial and biotechnological applications. In this study, a highly thermally stable β-galactosidase produced by Anoxybacillus sp. AH1 was purified and characterized. The highest enzyme production was achieved after the bacterium was incubated for 24 hours. The enzyme was purified by precipitation with ammonium sulphate dialysis, gel filtration chromatography using Sephadex G-75. After the purification steps, β-galactosidase was found to be purified 10.2-fold and a yield of 13.9%. The molecular mass of the β-galactosidase was estimated to be 75 kDa by SDS-PAGE. The purified enzyme was highly stable and retained at 71% of the original activity at 60 °C and 53% at 70 oC within 120 minutes. The Km and Vmax values of purified β-galactosidase were calculated as 1.249 mM and 0.5 μmol minutes-1 , respectively. Ca2+, Zn2+, and Mg2+ significantly activated β-galactosidase activity, whereas enzyme activity was inhibited significantly by Cu+2 as well as by the metal ion chelators1,10- phenanthroline (phen) and ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA). The Purified β-galactosidase activity was increased by PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride), PCMB (pchloromercuribenzoic acid), DTT (dithiothreitol), and β-ME (β-mercaptoethanol) at 2 mM, but inhibited completely by NEM (N-ethylmaleimide) at 1 mM.en_US
dc.description.abstractTermofilik bakterilerden elde edilen termostabil β-galaktosidazlar, endüstriyel ve biyoteknolojik uygulamalarda çeşitli avantajlara sahip oldukları için ilgi çekmektedir. Bu çalışmada, Anoxybacillus sp. AH1'den üretilen, oldukça termostabil olan β-galaktosidaz, saflaştırıldı ve karakterize edildi. En yüksek enzim üretimi, bakterinin 24 saat inkübe edilmesinden sonra elde edildi. Enzim, amonyum sülfat çöktürmesi, diyaliz ve jel filtrasyon kromatografisi (Sephadex G-75) kullanılırak saflaştırıldı. Saflaştırma aşamalarından sonra, βgalaktosidazın % 13,9 verimle 10,2 kata kadar saflaştırıldığı tespit edildi. β-galaktosidazın moleküler kütlesi, SDS-PAGE ile 75 kDa olarak tahmin edildi. Saflaştırılmış enzimin oldukça stabil olduğu ve 120 dakika sonunda 60 °C'de orijinal aktivitenin % 71'ini, 70 °C'de ise % 53'ünü koruduğu tespit edildi. Saflaştırılmış β-galaktosidazın Km ve Vmax değerleri sırasıyla 1,249 mM ve 0,5 μmol dakika-1 olarak hesaplandı. Ca2+, Zn2+ ve Mg2+ β-galaktosidaz aktivitesini önemli ölçüde aktive ederken, Cu2+ ve metal iyon şelatörleri, 1,10-phenanthroline (phen) ve ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) enzim aktivitesini önemli ölçüde inhibe etmiştir. Saflaştırılmış β-galaktosidaz aktivitesi 2 mM PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride), PCMB (pchloromercuribenzoic acid), DTT (dithiothreitol), ve β-ME (β-mercaptoethanol) ile artar iken, 1 mM NEM (N-ethylmaleimide) ile tamamen inhibe edildiği belirlendi.en_US
dc.identifier.citationAcer, Ö. ve Bekler, F. M. (2021). Characterization of a thermally stable β-galactosidase produced by thermophilic anoxybacillus sp. AH1. Türk Doğa ve Fen Dergisi, 10(1), 130-136.en_US
dc.identifier.doi10.46810/tdfd.835632en_US
dc.identifier.endpage136en_US
dc.identifier.issn2149-6366
dc.identifier.issue1en_US
dc.identifier.startpage130en_US
dc.identifier.urihttps://search.trdizin.gov.tr/tr/yayin/detay/437206
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11468/13331
dc.identifier.volume10en_US
dc.indekslendigikaynakTR-Dizinen_US
dc.institutionauthorBekler, Fatma Matpan
dc.language.isoenen_US
dc.publisherBingöl Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsüen_US
dc.relation.ispartofTürk Doğa ve Fen Dergisien_US
dc.relation.publicationcategoryMakale - Uluslararası Hakemli Dergi - Kurum Öğretim Elemanıen_US
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessen_US
dc.subjectEnzyme activity inhibitionen_US
dc.subjectThermostable β-galactosidaseen_US
dc.subjectEnzyme purificationen_US
dc.subjectAnoxybacillus sp. AH1en_US
dc.subjectEnzim aktivitesi inhibisyonuen_US
dc.subjectTermostabil βgalaktosidazen_US
dc.subjectEnzim saflaştırmaen_US
dc.titleCharacterization of a thermally stable ?-galactosidase produced by thermophilic anoxybacillus sp. AH1en_US
dc.title.alternativeThermofilik anoxybacillus sp. AH1'den üretilen termostabil ?-galaktosidazın karakterizasyonuen_US
dc.typeArticleen_US

Dosyalar

Orijinal paket
Listeleniyor 1 - 1 / 1
Küçük Resim
İsim:
Characterization of a Thermally Stable β-galactosidase Produced by Thermophilic Anoxybacillus sp. AH1.pdf
Boyut:
885.72 KB
Biçim:
Adobe Portable Document Format
Açıklama:
Makale dosyası
İndir
Lisans paketi
Listeleniyor 1 - 1 / 1
[ X ]
İsim:
license.txt
Boyut:
1.44 KB
Biçim:
Item-specific license agreed upon to submission
Açıklama:
İndir

Koleksiyon

Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümü Koleksiyonu
TR-Dizin İndeksli Yayınlar Koleksiyonu