POMC, iNOS, PGES, IL-4, IL-5 and IL-10 gene expression in peripheral blood mononuclear cells of cyclic and pregnant mares
Yükleniyor...
Tarih
2011
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Although a number of diff erent clinical and laboratory methods are used, there is still need for a practical, reliable and economical
diagnosis method for early pregnancy in mares. Objective was to provide a preliminary background for understanding immunological
modifications at molecular level during early pregnancy in mare and thereby to allow development of a practical pregnancy test.
Blood samples were collected from 10 pregnant and 4 cyclic mares on days of ovulation (d0), 4 and 8. Total RNA samples were isolated
from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and cDNA synthesis was performed. Pregnancy dependent gene expression profiles
of proopiomelanocortin (POMC), nitric oxide synthase (iNOS), prostaglandin E synthase (PGES), interleukin-4 (IL-4), IL-5 and IL-10 were
evaluated at mRNA level using semiquantitative Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction. Data were analyzed by General
Linear Model and possible diff erences between all mean factors were determined by Tukey’s analysis. No gene expressions were
observed for PGES, IL-5 and iNOS in PMBCs. Expressions of POMC, IL-4 and IL-10 were not significant on d0, 4 and 8, which suggested
that pregnancy or cyclic status had no eff ect on expression of these genes. Only, IL-10 mRNA expression was lower in pregnant mares
than cyclic mares (P<0.05).
Kısrakların erken gebelik tanısında farklı klinik yöntemler ve laboratuvar analizleri kullanılmaktadır. Ancak pratik, güvenilir ve ekonomik bir gebelik tanı yöntemine halen ihtiyaç bulunmaktadır. Bu çalışmada, gebelikle birlikte immun sistemde meydana gelen degişimlerin moleküler düzeyde belirlenmesi, gebelik immunolojisinin anlaşılması ve sonuçta pratik bir gebelik testi geliştirilmesi için bilimsel alt yapının hazırlanması amaçlanmıştır. Kan örnekleri, 10 baş gebe ve 4 baş gebe olmayan (siklik) kısraktan ovulasyon gününden başlayarak (0. gün), 4. ve 8. günlerde alındı. Periferal kan mononükleer hücrelerinden (PKMH) total RNA izolasyonu ve cDNA sentezi gerçekleştirildi. Proopiomelanocortin (POMC), nitrik oksit sentaz (iNOS), prostaglandin E sentaz (PGES), interlökin-4 (IL-4), IL-5 ve IL-10 gen ekspresyonlarında gebeliğe bağlı muhtemel değişiklikler mRNA seviyesinde Reverz Transkriptaz-Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PZR) ile semi-kantitatif olarak araştırıldı. İstatistiksel analizlerde General Linear Model ve modeldeki bütün etkenler için ortalama değerler (means) arasındaki farklılık olasılıkları Tukey analizi kullanılarak belirlendi. PKMH’de PGES, IL-5 ve iNOS gen ekspresyonları tespit edilemedi. İstatistiksel analizler sonucunda POMC, IL-4 ve IL-10 gen ekspresyonlarının 0., 4. ve 8. günler arasında mRNA düzeyinde herhangi bir farklılık göstermediği belirlendi. Gebeliğin veya siklik olmanın bu genlerin mRNA ekspresyonu üzerine uyarma veya baskılama şeklinde bir etkisi olmadığı tespit edildi. Yalnızca, IL-10 mRNA konsantrasyonunun gebe hayvanlarda siklik hayvanlara göre düşük olduğu belirlendi (P<0.05).
Kısrakların erken gebelik tanısında farklı klinik yöntemler ve laboratuvar analizleri kullanılmaktadır. Ancak pratik, güvenilir ve ekonomik bir gebelik tanı yöntemine halen ihtiyaç bulunmaktadır. Bu çalışmada, gebelikle birlikte immun sistemde meydana gelen degişimlerin moleküler düzeyde belirlenmesi, gebelik immunolojisinin anlaşılması ve sonuçta pratik bir gebelik testi geliştirilmesi için bilimsel alt yapının hazırlanması amaçlanmıştır. Kan örnekleri, 10 baş gebe ve 4 baş gebe olmayan (siklik) kısraktan ovulasyon gününden başlayarak (0. gün), 4. ve 8. günlerde alındı. Periferal kan mononükleer hücrelerinden (PKMH) total RNA izolasyonu ve cDNA sentezi gerçekleştirildi. Proopiomelanocortin (POMC), nitrik oksit sentaz (iNOS), prostaglandin E sentaz (PGES), interlökin-4 (IL-4), IL-5 ve IL-10 gen ekspresyonlarında gebeliğe bağlı muhtemel değişiklikler mRNA seviyesinde Reverz Transkriptaz-Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PZR) ile semi-kantitatif olarak araştırıldı. İstatistiksel analizlerde General Linear Model ve modeldeki bütün etkenler için ortalama değerler (means) arasındaki farklılık olasılıkları Tukey analizi kullanılarak belirlendi. PKMH’de PGES, IL-5 ve iNOS gen ekspresyonları tespit edilemedi. İstatistiksel analizler sonucunda POMC, IL-4 ve IL-10 gen ekspresyonlarının 0., 4. ve 8. günler arasında mRNA düzeyinde herhangi bir farklılık göstermediği belirlendi. Gebeliğin veya siklik olmanın bu genlerin mRNA ekspresyonu üzerine uyarma veya baskılama şeklinde bir etkisi olmadığı tespit edildi. Yalnızca, IL-10 mRNA konsantrasyonunun gebe hayvanlarda siklik hayvanlara göre düşük olduğu belirlendi (P<0.05).
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Horse, Pregnancy, PBMC, Gene expression, RT-PCR, At, Gebelik, PKMH, Gen ekspresyonu, RT-PZR
Kaynak
Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi
WoS Q Değeri
Q3
Scopus Q Değeri
Cilt
17
Sayı
2
Künye
Kurar, E., Atlı, M. O., Güzeloğlu, A. ve Semacan, A. (2011). POMC, iNOS, PGES, IL-4, IL-5 and IL-10 gene expression in peripheral blood mononuclear cells of cyclic and pregnant mares. Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 17(2), 319-323.
